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如何检测糖化血红蛋白

如何检测糖化血红蛋白

【案例经过】

应内分泌科的要求,检验科在1998年开展了糖化血红蛋白(GHb)的检测。

        刚开始时,标本很少,操作人员对检测方法的影响因素也不太了解,做出来的结果有时与临床不相符,抱怨很多。

后来,检验医师潜心学习,终于掌握了其中的操作技巧和影响因素,并由专人来做,这样可以保证检测结果的可比性,临床医生很是满意。

不过,好景不长,内分泌科新换的主任说笔者做的糖化血红蛋白结果普遍偏高,包括正常参考值。

笔者查阅了有关文献,糖化血红蛋白的测定方法有很多种,每一种方法所测得的成分不一样,其参考值也不一样,大致情况如下表:

检测方法 参考值 检测方法 参考值
电泳法
HbA1 5.6%~7.5%

HbA1b 0.8%
柱层析法
HbA1 6%~8%

HbA1c 3%~6%
高效液相色谱法
HbA1a 1.6%
免疫凝集法
HbA1c 3.6%~6.0%

        既然主任提出来问题了,而且笔者也觉得合情合理。经过调研,笔者把检测方法改为免疫法。笔者检测糖化血红蛋白用的是微注法,检测的组分为HbA1,不仅包含HbA1c,还包含HbA1a、HbA1b。因此,笔者的结果也就普遍偏高,依试剂说明书上的参考值定为6%~8%。

免疫法使用单克隆或多克隆抗体直接测定血红蛋白β链上的糖基化的N-末端的4~8个氨基酸,对HbA1c上的糖基特异性好。因此,这种方法检测的是HbA1c单一组分,说明书提供的参考值范围为3.6%~6.0%。

检测成分单一了,试剂稳定性好,结果重复性也好了,主任很满意,笔者也高兴。

可是又过了几年,内分泌科一名刚从外院调动进来的李医生找到笔者,说笔者的糖化血红蛋白测定的结果好像普遍偏低。原来,他原来的医院糖化血红蛋白的参考值就是6%~8%。

笔者想,李医生原来的那家医院用的方法应该是微注法或电泳法,他在原医院工作多年,已经习惯了那里的检测方法和检测数值,调到我们医院反倒不习惯了。

那么,笔者到底应该采用哪种方法检测糖化血红蛋白,才能更好地为临床和患者服务呢?

【分析与心得】

    1.       本案例涉及HbA1c检测方法的标准化问题,在临床实验室中,检验人员常会遇到这样的问题。那么,检验人员应该如何为临床提供合理的检测方法进而得到准确的检测数据呢?实际工作中,有时是临床科室有新增检验项目的需求,希望检验科室能够开展此项检验。开展此项检验项目前,检验科室应该与临床科室共同就开展项目的意义、方法的选择和方法的敏感度、特异性、重复性以及标本例数等问题进行交流,达成共识后再常规开展。

    2。       目前,糖化血红蛋白的检测方法有十多种,基本上可分为两大类:一类是基于GHb与Hb的电荷不同,如离子交换层析法、电泳法;另一类是基于Hb上糖化基团的结构特点,如亲和层析法,免疫法,离子捕获法和酶法等。实验室中常用的HbA1c测定方法因所用原理、方法不同,所测组份(HbA1c或HbA1)有差异,加上变异血红蛋白(Hbs,Hbc,HbE和HbF)的影响,使得测定结果的准确度、重复性甚至标本的稳定性都有所差异。

    3.       2002年,国际糖尿病联盟明确规定,糖化血红蛋白是国际公认的糖尿病监控“金标准”。美国糖尿病学会(ADA)建议HbA1c控制在小于7%;国际糖尿病联盟(IDF)建议HbA1c控制标准为小于6.5%;目前,我国将糖尿病患者HbA1c的控制标准定为6.5%以下。2009年,在美国奥尔良召开的糖尿病年会上,由美国糖尿病学会、国际糖尿病联盟和欧洲糖尿病研究学会组建的国际专家委员会建议,将HbA1c检测作为新的糖尿病诊断标准。为了更好地治疗患者,为临床医生提供准确的实验室数据,2007年5月,由ADA、EASD、IDF、IFCC一致提出共同协议,HbA1c检测结果将在全世界范围内标准化,进一步实现世界范围内HbA1c结果的可比性。

    4.       尽管国际上就糖化血红蛋白测定的标准化达成共识,但我国还处于起步阶段。因此,推行糖化血红蛋白检测标准化是大势所趋。重视量值溯源,统一标准物质,及案例参考系统、网络实验室及认可体系,定期质量控制,以提高糖化血红蛋白测定的准确性是检验工作人员的责任。

【经典箴言】

为临床提供合理的检测方法,检测数据是实验室工作人员义不容辞的责任。

【毛远丽主任技师点评】

本案例描述了检验科根据临床医生的需求,选择糖化血红蛋白检测犯法及其改变相应参考值范围的过程。每当检验科开展一个新项目时,都应该经过对该项目方法学的选择与建立、参考范围的建立或验证、方法性能评估(敏感性、特异性、重复性)以及建立室内质量控制等一系列工作。同时,还要就该项目的影响因素、临床意义以及应用进展及时与临床进行沟通,特别是像本案例中涉及的糖化血红蛋白检测方法时,就要选择国际认可度高、应用广泛的方法。实验室只有对项目建立起完整的检测体系,才能真正给临床提供准确可靠的检验结果。



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